抗rhEPO单克隆抗体的制备及初步应用

摘要：

目的: 研制抗人促红细胞生成素的特异性单克隆抗体(mAb), 对其生物学特性进行初步鉴定, 并用于转基因羊乳中重组人促红细胞生成素(rhEPO)的提纯.方法: 以自制的rhEPO粗品免疫BALB/c小鼠, 制备抗rhEPO 的mAb.以Western blot和间接ELISA法, 对所获mAb进行初步鉴定.以纯化的mAb同预活化的Sepharose- 4B偶联, 制得mAb亲和层析柱, 并用于转基因羊乳中rhEPO的提纯. 结果: 获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞株(1E7和2E6).Ig亚类(型)的鉴定分别为IgG1 和IgG2b, 轻链均为κ型.用Western blot证实, 获得的mAb可特异性地识别rhEPO.用自制的免疫亲和层析柱用于转基因羊乳中rhEPO的提纯, 具有很好的吸附作用, 回收率达70%.结论: 成功地获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞.用自制的免疫亲和层析柱提纯转基因羊奶中的rhEPO具有较高的吸附效率.

关键词：重组人促红细胞生成素、单克隆抗体、免疫亲和层析

所属期刊栏目：20

分类号：R392.11

在线出版日期：2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：696-698