抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的: 构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体, 并在CHO(dhfr-)细胞中表达.方法: 从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中, 扩增VH 及VL基因.以回收的PCR产物为模板, 用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、 VL基因. 经Xba I/BamH I和Xho I/Hind III酶切后, 分别插入真核表达载体pWD中, 构建重组载体pWDκH. 经PCR和测序鉴定正确后, 用lipofectAMINE 2000转染CHO(dhfr-)细胞.取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达.结果: 构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDκH, 并在CHO(dhfr-)细胞中表达.结论: 在CHO(dhfr-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG, 为其临床应用奠定了基础.

关键词：基因工程、抗角蛋白全抗体、CHO(dhfr-)

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分类号：R446.62;R758.2(诊断学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215361

在线出版日期：2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：693-695,707