人端粒酶催化亚单位mRNA的实时荧光RT-PCR定量检测

摘要：

目的:建立可定量测定人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法.方法:用Trizol 试剂从HepG2细胞中分离总RNA,然后反转录为cDNA.利用一对基因特异引物和一条TaqMan MGB探针,以实时荧光PCR定量hTERT的cDNA.同时定量测定人β-肌动蛋白(hBA)的mRNA作为内对照.用梯度稀释的克隆的人β-肌动蛋白基因制作标准曲线.结果:标准曲线的相关系数为1.00.实时荧光反转录PCR方法的平均变异系数为7.1%.HepG2细胞hTERT mRNA与hBA mRNA的比值为(1.3±0.3)×10-4.结论:建立了可定量测定人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法.本方法的建立将有助于研究端粒酶的生物功能.

关键词：实时PCR、人端粒酶催化亚单位、端粒酶

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：陕西省自然科学基金2003C217

在线出版日期：2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：618-620