抗人TNF单克隆抗体对TNF诱导的NF-κB核转位的抑制作用

摘要：

目的:鉴定3株抗人TNF单克隆抗体(mAb)D2、E6和F6对TNF诱导的NF-κB核转位的抑制作用.方法:将不同浓度的3株mAb及无关mAb分别与TNF溶液孵育后,加入到ECV304细胞培养液中.孵育1 h后收获细胞,从中提取核蛋白并测定其含量,用电泳迁移率变动分析(EMSA)检测核提取液中NF-κB的核转位.结果:3株抗TNF mAb均可抑制TNF诱导的ECV304细胞中NF-κB的核转位.其中mAb D2的抑制作用最强,其次为mAb F6和E6,无关对照抗体也有一定的非特异性反应.抑制作用与加入的mAb呈良好的剂量依赖关系,在10 mg/L和0.1 mg/L条件下,mAb D2的抑制率分别为94.2%和75.1%,mAb E6分别为64.9%和28.6%,mAb F6分别为70.3%和49.5%,无关对照抗体分别为20.0%和11.1%.结论:mAb D2、E6和F6可特异性地抑制TNF诱导的NF-κB核转位,为制备对感染性疾病和自身免疫性疾病等均具有治疗作用的嵌合抗体奠定了基础.

关键词：肿瘤坏死因子、单克隆抗体、NF-κB、电泳迁移率变动分析(EMSA)

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分类号：R392.11

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510004;国家自然科学基金30371281

在线出版日期：2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：585-587