抗CD3 scFv基因的真核表达及其生物学活性鉴定

摘要：

目的: 真核表达抗CD3单链抗体(scFv), 并研究其生物学活性.方法: 将编码抗CD3 scFv的DNA片段插入真核表达载体pDisplay中. 对所构建重组表达载体进行测序确认后, 以电穿孔法将重组质粒导入Hela细胞, 以原位杂交法检测抗CD3 scFv的表达, 以3H TdR 掺入法检测其在体外对T细胞的活化作用, 以MTT比色法观察转染的Hela细胞与T细胞混合培养后, 诱发的细胞毒性T细胞的杀伤作用.结果: 成功地构建了抗CD3 scFv的真核表达载体, 并在Hela细胞中获得表达.所分泌的抗CD3 scFv在抗CD28 mAb存在的条件下, 能够刺激T细胞活化.将转染的Hela细胞与T细胞混合培养能够诱发CTL的杀伤作用.结论: 真核表达的抗CD3 scFv具有刺激T细胞活化的活性, 可用于构建对肿瘤进行免疫治疗的双功能分子.

关键词：抗CD3scFv、真核表达、生物学活性

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：卫生部科研项目98-1-232;陕西省自然科学基金2002C118

在线出版日期：2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：552-555