HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达

摘要：

目的: 研究GM-CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用. 方法: 采用PCR方法, 扩增HBV preS2+S基因约846 bp的片段和rhGM-CSF(包括甘氨酸接头)基因450 bp的片段.通过T-A克隆技术和基因定向克隆, 构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1-S2S-rhGM-CSF, 并在HepG2细胞中表达.结果: 经酶切、 PCR及DNA测序鉴定, 融合基因表达质粒HBVpreS2S-rhGM-CSF成功地构建.将其转染HepG2细胞后, 目的基因的转录通过RT-PCR得到证实, 而且表达的融合蛋白能与抗-HBs、抗-preS2和抗-GM-CSF单克隆抗体(mAb)均产生特异性反应. 结论: 融合基因表达载体pcDNA3.1-S2S-rhGM-CSF的成功构建并表达, 为进一步研究乙肝DNA疫苗奠定了实验基础.

关键词：HBV、preS2、GM-CSF、融合基因

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：548-551