抗HBV中和抗体MA18/7轻链可变区VL与GFP融合蛋白的表达及生物活性测定

摘要：

目的:在大肠杆菌中表达抗HBV中和抗体MA18/7轻链可变区基因(VL)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白,并测定其生物学活性.方法:应用基因工程技术,将EGFP基因克隆到载体pTO-T7中构建原核表达载体.然后将MA18/7的VL基因按照读码框插入到无终止密码子TAA的EGFP基因的5′末端,构建融合蛋白表达载体.通过ELISA和相对荧光强度测定在大肠杆菌中表达的融合蛋白的活性.结果:构建了EGFP-MA18/7-VL表达载体.SDS-PAGE表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在.荧光测定显示,融合蛋白保持了GFP的荧光性质.ELISA的结果表明,融合蛋白与重链可变区(VH)片段结合成的Fv,能特异性地识别HBV pre-SI抗原.结论:成功地获得具有良好生物学活性的融合蛋白,可用于进一步的研究.

关键词：轻链可变区、GFP、融合蛋白

所属期刊栏目：20

分类号：R392.11

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA628120

在线出版日期：2004-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：444-448