抗角蛋白Fab抗体在大肠杆菌中的表达与复性研究

摘要：

目的:用大肠杆菌分别表达抗角蛋白抗体的轻链和Fd片段,体外复性得到Fab抗体.方法:从已构建的质粒p3MH/Fab中,亚克隆抗角蛋白抗体的轻链和Fd片段基因,并分别插入载体pET32a中,构建重组质粒.以重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行表达.SDS-PAGE分析发现,在相对分子量(Mr)为25 000处有外源蛋白表达.轻链和Fd片段变性后等量混合于折叠液中,复性后形成Mr约为45 000的蛋白.结果:成功地表达抗角蛋白抗体的轻链和Fd片段,ELISA和Western blot证实,复性产物具有与角蛋白结合的能力.结论:获得了具有活性的抗角蛋白的Fab抗体,为其应用研究打下了基础,也表明包涵体表达基因工程抗体技术是可行的.

关键词：Fab、角蛋白、表达、复性

所属期刊栏目：20

分类号：Q512+.6(蛋白质)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215361;国家自然科学基金30371650

在线出版日期：2004-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：441-443