抗胰蛋白酶原激活肽单克隆抗体的制备及应用

摘要：

目的:制备抗胰蛋白酶原激活肽(TAP)单克隆抗体(TAPmAb),并建立敏感、特异的TAP免疫检测方法.方法:将人工合成的TAP与血蓝蛋白(KLH)交联制成免疫原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆,经多次克隆化,获得稳定分泌TAP mAb的杂交瘤细胞株,并进行鉴定,进而建立检测TAP的ELSIA竞争法.结果:获得10株能稳定分泌TAP mAb的杂交瘤细胞株,除1株为IgG1外,余9株均为IgM类;效价达1:105～1:106;与BSA、人白蛋白、胰蛋白酶原、淀粉酶均无交叉反应,中和抑制试验表明培养上清、腹水中的抗体能明显被TAP中和.建立了检测TAP的ELISA竞争法,灵敏度为0.69μg/L,批内变异系数为9.10%,批间变异系数为10.33%.用该法测定急性胰腺炎组患者及对照组患者TAP含量分别为57.35ug/L及9.30μg/L(P＜0.01).结论:成功制备抗TAP mAb,并建立了敏感的ELISA竞争法.

关键词：急性胰腺炎、胰蛋白酶原激活肽、单克隆抗体、ELISA

所属期刊栏目：20

分类号：R392.12

资助基金：广东省广州市教委科研项目01-29

在线出版日期：2004-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：425-428