一株变异SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定

摘要：

目的:克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的DNA,构建原核表达质粒pGEX-2T/N,并诱导表达.方法:采用RT-PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段,并克隆入T-EASY载体中.经PCR、双酶切鉴定后,测序.将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX-2T中,表达融合蛋白.用表达产物与抗SARS-CoV抗体阳性血清做Westernblot.结果:N蛋白DNA测序的结果与GenBank比对缺失20个bp.GST-N融合蛋白以可溶形式表达.Western blot检测表明,其与抗SARS-CoV抗体阳性血清的反应呈阳性.结论:成功地构建原核表达质粒pGEX-2T/N,并表达GST-N融合蛋白,为下一步的研究奠定了基础.

关键词：严重急性呼吸综合征、冠状病毒(SARS-CoV)、N蛋白、变异、表达

所属期刊栏目：20

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30340010;北京市自然科学基金7034050

在线出版日期：2004-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：422-424