转位肽/粒酶B融合蛋白基因的构建、表达及对细胞生长的抑制作用

摘要：

目的:研究转位肽/粒酶B融合蛋白对细胞生长的抑制作用.方法:采用重组PCR法,将绿脓杆菌外毒素(PE)部分转位肽编码序列与活性型粒酶B(GrBa)基因相融合,构建PE Ⅱ-GrBa融合蛋白基因,以粒酶活性中心丝氨酸突变的PE Ⅱ-mGrBa作为阴性对照.将所获重组基因克隆入真核表达载体pcDNA3和pIRES2-EGFP中,以脂质体法瞬时转染Hela等细胞系,通过与GFP共表达,用MTT比色、TUNEL及间接免疫荧光染色,检测PE Ⅱ-GrBa基因的表达对转染细胞的形态和生长的影响.结果:表达PE Ⅱ-GrBa融合蛋白的细胞的细胞骨架发生异常,细胞生长受到抑制,部分细胞呈现凋亡特征.结论:PE Ⅱ-GrBa融合蛋白的表达可抑制细胞生长.

关键词：粒酶B、转位肽、生长抑制

所属期刊栏目：20

分类号：Q255(细胞生理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA217101;国家自然科学基金39925036;军队医药卫生科研项目o1Zo9o

在线出版日期：2004-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：394-397,401