人源抗狂犬病毒单链抗体库的构建及体外亲和筛选

摘要：

目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(scFv)库,筛选抗狂犬病毒特异性、高亲和力的scFv.方法:应用重组噬菌体抗体技术,从经狂犬病毒WISTAR PM株疫苗免疫者的外周血淋巴细胞中,分离并构建scFv基因.将其克隆人噬粒载体pCANTAB-5E中,转化于大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.采用狂犬病毒Vero疫苗亲和富集法,淘选阳性重组噬菌体,经鉴定后对其进行序列分析.用竞争ELISA,初步检测重组scFv的特异性抗原结合活性.结果:成功地构建了库容量约为7×108抗狂犬病毒噬菌体scFv库,筛选到1株新的抗狂犬病毒的scFv-S12.结论:噬菌体展示scFv库的成功构建及人源抗狂犬病毒特异性scFv的获得,为进一步研制抗狂犬病毒的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定了基础.

关键词：狂犬病毒、噬菌体展示技术、单链抗体

所属期刊栏目：20

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：243-247