人钙周期素结合蛋白(hCacyBP)基因的原核表达及其鼠抗血清的制备

摘要：

目的:原核表达hCacyBP并制备小鼠抗hCacyBP多克隆抗体.观察该蛋白组织分布情况,研究其可能在胃癌多药耐药形成中的作用.方法:将hCacyBP基因的全编码区克隆进原核表达载体pET28a中,转化E coli,以IPTG诱导重组目的蛋白的表达.以纯化的重组目的蛋白作为免疫原免疫小鼠,制备相应的多克隆抗体.以Western blot法检测hCacyBP在兔10种组织的表达情况;以Western blot和免疫组化染色法检测hCa-cyBP在胃癌耐药细胞SGC7901/VCR及其亲本药敏细胞SGC7901中的表达和分布.结果:成功地表达重组目的蛋白并制备了小鼠抗hCacyBP的多克隆抗体,Western blot分析显示,hCacyBP在兔的10种组织中均有表达,在脑和肝组织中表达略高;hCacyBP在胃癌耐药细胞SGC7901/VCR及其亲本药敏细胞SGC7901中的表达未见明显差异.结论:CacyBP是在多种组织中广泛表达的一种蛋白质.制备的小鼠抗hCa-cyBP多克隆抗体特异性较高,为进一步研究hCacyBP的功能提供了工具.

关键词：人钙周期素结合蛋白、表达、多药耐药性

所属期刊栏目：20

分类号：R392.012

资助基金：国家自然科学基金30030140

在线出版日期：2004-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：206-209