抗rh-bFGF嵌合抗体真核表达载体的构建与表达

摘要：

目的:构建并在真核细胞中表达抗人重组碱性成纤维生长因子(rh-bFGF)人-鼠嵌合抗体.方法:从分泌抗rh-bFGF鼠单抗(mAb)1F11的杂交瘤细胞中扩增、克隆V1、VH基因,从质粒pMDHC和pMDLC中扩增、克隆CL、CH基因,测序鉴定后插入真核表达载体,并转化二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(CHO-dhfr-)细胞进行表达.采用间接ELISA检测表达产物的人源性和其抗原结合活性.结果:序列测定表明所克隆的抗体基因是功能性抗体的V区基因,在转化细胞的培养上清中可检测到抗rh-bFGF嵌合抗体的表达.ELISA试验证实,该嵌合抗体具有人源C区,并具有鼠mAb 1F11的抗原结合活性.结论:在真核细胞中成功地表达抗rh-bFGF的人-鼠嵌合抗体,为其临床应用研究奠定了基础.

关键词：碱性成纤维生长因子、嵌合抗体、基因表达、CHO细胞

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省广州市科技局科技攻关项目2003J1-C01712;国家计委部门重点项目1997-2071

在线出版日期：2004-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：163-167