RhoC在胃癌细胞中的表达及其小干扰RNA表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的:检测RhoC在胃癌细胞系中的表达,并构建其小干扰RNA(siRNA)表达载体.方法:以Western blot方法检测RhoC在多株胃癌细胞系中的表达.利用计算机辅助设计RhoC特异性siRNA,体外合成siRNA基因并将其定向克隆人真核表达载体mU6pro.以脂质体法转染RhoC-siRNA载体至高转移的人胃癌细胞系AGS中,以Western blot方法鉴定RhoC-siR-NA对RhoC表达的作用.结果:RhoC蛋白在具有高转移潜能的胃癌细胞系中表达增强.利用Bbs Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切法鉴定重组载体后,DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确并已被准确克隆人mU6pro载体.RhoC-siRNA载体可特异性抑制AGS细胞中RhoC的表达.结论:RhoC特异性siRNA表达载体成功构建,为后期基因治疗的研究奠定了基础.

关键词：RhoC、小干扰RNA、胃癌、转移

所属期刊栏目：20

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30140026;国家自然科学基金30030140

在线出版日期：2004-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：148-151