10.3321/j.issn:1007-8738.2004.02.005
肝细胞癌相关抗原编码基因HCA520与钙离子的结合分析
目的:分析肝细胞癌相关抗原编码基因HCA520与钙离子的关系.方法:通过PCR获得目的基因,构建至原核表达载体pGEX-4T-3中.在大肠杆菌中诱导表达后,用亲和层析法进行纯化.Western blot对所获蛋白进行鉴定,Dot blot分析GST-HCA520融合蛋白与钙离子的关系.结果:琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定表明,重组原核表达载体pGEX-4T-3中,HCA520基因的插入方向及序列完全正确.Western blot分析显示,纯化的蛋白均含有GST部分,是所需的目的蛋白.HCA520融合蛋白能够以剂量依赖的方式与钙离子结合.结论:HCA520基因原核表达的蛋白能够与钙离子结合,提示其可能是一种新的钙离子结合蛋白.
HCA520、原核表达载体、钙离子结合蛋白
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Q75(分子遗传学)
国家重点基础研究发展计划973计划G1999053904;北京市自然科学基金7001002
2004-06-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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