小鼠白细胞介素21 cDNA的克隆及真核表达质粒的构建

摘要：

目的:克隆小鼠白细胞介素21(IL-21)基因, 构建真核表达质粒, 用以进行肿瘤的基因治疗. 方法:用RT-PCR法, 从ConA活化的小鼠T细胞中扩增IL-21 cDNA, 克隆入哺乳动物细胞高效表达质粒pcDNA3.1中, 构建重组mIL-21真核表达质粒.重组体用载体上的通用引物和PCR下游引物为测序引物, 鉴定克隆的正确性.将已鉴定的重组质粒用脂质体法转染Sp2/0细胞, 用RT-PCR法鉴定转染细胞中IL-21基因的表达, 用MTT比色法检测表达的mIL-21诱导的NK细胞杀伤活性的增强. 结果:正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1/mIL-21, 并在转染的细胞中检测出IL-21的表达, 表达的mIL-21可在体外增强NK细胞的杀伤活性.结论:成功地构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1/mIL-21, 为进一步在肿瘤动物模型中进行IL-21基因治疗及疗效观察奠定了基础.

关键词：白细胞介素21、RT-PCR、重组质粒

所属期刊栏目：20

分类号：R392.1

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：49-52