10.3321/j.issn:1007-8738.2004.01.005
截短型人bid基因的克隆、表达和促凋亡作用的研究
目的:探讨截短型 bid(truncated bid, tbid)基因的表达对Hela细胞的促进凋亡活性.方法:用RT-PCR法克隆人全长bid基因, 测序正确后, 通过PCR截去编码N末端60个氨基酸残基的基因, 而获得tbid基因.将其克隆入含绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pIRES2-EGFP中, 用脂质体法转染Hela细胞.通过荧光显微镜、电子显微镜观察和TUNEL检测法, 检测目的基因的表达对转染细胞的形态及生长状况的影响.结果:成功地构建了tbid基因的真核表达载体.以其转染Hela细胞后, tbid基因在细胞中得到表达, 随后引起细胞荧光强度下降, 生长状况不良甚至死亡.电镜观察及TUNEL检测的结果显示, 许多细胞呈典型的凋亡特征. 结论:tbid基因的表达可促进Hela细胞的凋亡.
bid基因、细胞凋亡、绿色荧光蛋白、Hela细胞
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Q255(细胞生理学)
国家杰出青年科学基金399Z5036;国家高技术研究发展计划863计划2001AA217101
2004-03-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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