hdll1ext-Fc融合蛋白真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的:构建人dll1ext(human delta-like1 extracellular region)-Fc融合蛋白的真核表达载体pEF-BOSneo-hdll1ext-Fc, 并在COS-7细胞中进行表达.方法:从人脑cDNA文库中PCR扩增人delta-like1胞外段, 通过DNA重组构建真核表达载体pEF- BOSneo-hdll1ext-Fc.瞬时转染COS-7细胞, 应用RT-PCR、细胞免疫荧光技术和双抗体夹心ELISA, 检测融合蛋白的表达.结果:成功地构建了真核表达载体pEF-BOSneo-hdll1ext-Fc.以重组载体转染COS-7细胞后, RT-PCR结果显示delta-like1胞外段与IgG1 Fc在mRNA水平正确拼接; 细胞免疫荧光染色呈阳性反应; 夹心ELISA法检测到细胞培养上清中有融合蛋白的表达.结论:成功地扩增了人delta-like1胞外段, 构建了pEF-BOSneo-hdll1ext-Fc真核表达载体, 并在COS-7细胞中获得表达, 为下一步研究奠定了基础.

关键词：delta-like1、融合蛋白、基因克隆、真核表达

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划001CB509906;国家自然科学基金30200148

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：11-14