鼠抗人内皮抑素单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的: 制备抗人内皮抑素的单克隆抗体(mAb), 为深入研究内皮抑素的作用机制提供一种有用的试剂.方法: 以毕赤酵母表达的内皮抑素为免疫原免疫BALB/c小鼠, 采用B细胞杂交瘤技术, 以间接ELISA法筛选分泌抗人内皮抑素的特异性mAb的杂交瘤细胞株, 并诱生腹水. 腹水中的mAb采用Protein A Sepharose CL- 4B进行纯化.以标准的抗Ig血清做ELISA, 鉴定mAb的Ig类、亚类及型; 用免疫印迹法鉴定mAb的特异性.结果: 获得1株可分泌抗人内皮抑素mAb的杂交瘤细胞株4E7, 该株杂交细胞分泌的mAb属于IgG1(λ型).腹水mAb的效价为1×10-4～1×10-6, 纯化后大于1×10-10.免疫印迹结果显示, mAb 4E7可特异性地与酵母及大肠杆菌表达的内皮抑素起反应, 而与bFGF等其他细胞因子不发生交叉反应.结论: 分泌抗人内皮抑素mAb杂交瘤细胞株的建立, 为进一步研究奠定了基础.

关键词：内皮抑素、单克隆抗体、杂交瘤

所属期刊栏目：19

分类号：R392.12

资助基金：军事医学科学院生物工程研究所资助项目

在线出版日期：2004-01-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：580-581