可溶性HLA-A2-肽组装复合物的研制及初步鉴定

摘要：

目的: 诱导表达HLA-A2的两个亚基-重链(HC)和轻链β2m, 并将其纯化产物和特异性肽段结合为HLA-A2-肽复合体.方法: 将HC工程菌和β2m工程菌经0.5 mmol/L IPTG诱导5 h.经超声破菌及专利技术处理获得精制包涵体, 再复性、超滤浓缩后, 用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析进行纯化.然后, 将HC、β2m与两条特异性肽段分别结合, 用Superdex 75凝胶过滤纯化, 并用其天然结构的单克隆抗体(mAb)W6/32进行初步鉴定.结果: HC工程菌和β2m工程菌诱导表达的水平分别为43%和47%, HC和β2m纯化后的纯度均达到95%.两条特异性肽段与HC和β2m可组装成HLA-A2-肽复合体, 纯化的HLA-A2-肽复合物在4℃可保存2个月左右, 并可与mAb W6/32特异性结合.结论: HLA-A2的HC工程菌和轻链β2m工程菌均具有较高的表达水平, 与相应的特异性肽段可形成稳定的可溶性HLA-A2-肽复合物, 为进一步研究细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的识别和应答奠定了基础.

关键词：HLA-A2重链HC、β2微球蛋白、HLA-A 2-肽组装复合体、表达、纯化

所属期刊栏目：19

分类号：R392.11

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215121

在线出版日期：2004-01-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：538-540