DnaJ类分子伴侣PBP的基因克隆及亚细胞定位研究

摘要：

目的:从人骨骼肌cDNA文库中,分离、鉴定视网膜感光受体外周蛋白的结合蛋白(PBP)-DnaJ(HSP40)类分子伴侣,并初步分析其在转染的哺乳动物细胞中的表达及分布.方法:以32p-dCTP标记探针杂交筛选人骨骼肌cDNA文库,对阳性克隆进行序列分析,并以脂质体介导转染哺乳动物细胞,用免疫印迹及间接免疫荧光染色法检测目的蛋白的表达.结果:筛选出全长pbp基因,经与GenBank中的序列比较分析证实,与DnaJ家族的1个成员-mrj(1.5kb)的序列相同,且含140 bp左右富含GC的非编码区上游序列.在COS-7细胞中瞬时表达的PBP,大多呈典型的胞浆分布,而J-domain缺失的pbp片段多为胞核分布.而在CHO细胞中稳定表达的PBP,在处于不同细胞周期时相的细胞中的分布不同.结论:DnaJ除与HSP70(DnaK)协同发挥重要功能外,其本身作为分子伴侣也可能发挥着重要作用,且与细胞周期可能存在某种密切联系.

关键词：DnaJ分子伴侣蛋白、基因、转染细胞、外周蛋白结 合蛋白

所属期刊栏目：19

分类号：Q51(蛋白质)

资助基金：军队重点项目01MA060

在线出版日期：2004-01-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：531-534