含3C蛋白酶切位点的人CD226胞膜外区Ig融合蛋白的真核表达及应用

摘要：

目的: 构建含3C蛋白酶酶切位点的人CD226(PTA1)分子胞膜外区Ig融合蛋白编码基因的真核表达载体,并进行表达和初步鉴定. 方法: 将人CD226分子的胞膜外区基因, 克隆入含3C蛋白酶靶序列的Ig真核表达载体p-3C-Ig中.测序证实后, 转染COS7细胞并进行瞬时表达.表达产物经亲和层析柱纯化, 并通过免疫荧光染色及3C蛋白酶酶切反应进行鉴定. 结果: 经表达和纯化获得CD226胞膜外区的Ig融合蛋白. 该融合蛋白可与表达于ECV304细胞表面的CD226配体有效结合.同时, 融合蛋白的Fc段亦经3C蛋白酶切除, 从而获得CD226胞膜外区的真核表达分子.结论: 成功地获得了含有3C蛋白酶酶切位点的人CD226分子胞膜外区Ig真核表达产物, 为进一步对CD226分子进行结构和功能研究, 以及X线结晶衍射提供了重要条件.

关键词：CD226(PTA1)、真核表达、融合蛋白、3C蛋白酶

所属期刊栏目：19

分类号：R392.11

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510004;国家自然科学基金30030130;国家自然科学基金39980006

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：288-290