用体外致敏的鼻咽癌患者B细胞构建噬菌体抗独特型抗体库

摘要：

目的: 构建噬菌体人源抗独特型抗体库.方法: 体外致敏并用EBV转化鼻咽癌患者的PBMC.用PCR分别扩增VH和VL基因并组成ScFv基因.将ScFv基因与载体连接后, 转化大肠杆菌MC1061, 构建噬菌体呈现型ScFv库.结果: 经EBV转化的10例鼻咽癌患者的PBMC中, 8例有鼻咽癌抗独特型抗体产生.经多次PCR, 扩增出5种VH(γ、μ)和7种VL(κ、λ)基因, 经连接组成14种ScFv基因.将ScFv基因与载体连接后, 导入大肠杆菌MC1061.经四环素抗性筛选, 得到库容为1.1×107的初级噬菌体抗独特型抗体库, 噬菌体DNA中全长ScFv基因的插入率为70%.结论: 用体外致敏法结合噬菌体抗体库技术, 制备人源抗独特型单链抗体(Ab2β ScFv)的策略是可行的.

关键词：鼻咽癌、噬菌体呈现技术、抗独特型抗体

所属期刊栏目：19

分类号：R739.63(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30270521;湖南省自然科学基金01JJY2021;教育部留学回国人员科研启动基金;湖南省卫生厅科研项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：266-268，271