检测可溶型CD226双mAb夹心ELISA的建立及初步应用

摘要：

目的:建立一种检测可溶型CD226(sCD226)的双mAb夹心ELISA,并用于临床标本的检测.方法:确定包被mAb LeoA1和HRP-mAb FMU3的最佳工作浓度及最佳稀释液后,建立双mAb夹心ELISA,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行鉴定.再以建立的方法检测临床标本.结果:包被mAb LeoA1的最佳工作浓度为2.5 mg/L,HRP-mAb FMU3的最佳工作浓度1∶ 400,标准品及HRP-mAb的最佳稀释液分别为1 g/L BSA-1 mL/L Tween20-PBS和30 g/L PEG-PBS.建立的双mAb夹心ELISA,其特异性(与人IgG无交叉反应,阻断实验中阻断效应呈剂量依赖性)、敏感性(检出下限为110 ng/L标准品CD226/Fc融合蛋白)及稳定性(CV<10.2%)均较良好.对部分临床标本的检测中,发现6例类风湿关节炎(RA)患者血清sCD226的水平升高,与正常人血清sCD22 6水平相比差异显著(P<0.01).结论:建立一种特异性高、重复性好、较敏感的检测sCD226的双mAb夹心ELISA,初步证明可用于临床标本的检测.

关键词：可溶型CD226(PTA1)、ELISA、类风湿关节炎

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分类号：R392.11

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510004;国家自然科学基金30030130

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：192-194