抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

摘要：

目的:制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体(mAb),建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法.方法:以hBCMA-Ig融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗Fc段mAb,用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法; Wester n blot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性.将mAb与Sepharose4B交联,制备亲和层析柱,对LAIR1-Ig融合蛋白进行纯化.结果:获得7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤(FMUFc1～FMUFc7).利用FMUFc4作为包被mAb,FMUFc5作为酶标记mAb,成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法,敏感度达到2 μg/L; 在7株mAb中,FMUFc6可用于Ig融合蛋白的Western blot检测.用FMUFc6 mAb制备的亲和层析柱,可有效地纯化LAIR1-Ig融合蛋白. 结论:成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb,建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法,为Ig融合蛋白的应用提供了有力手段.

关键词：Ig融合蛋白、单克隆抗体、表位、亲和层析

所属期刊栏目：19

分类号：R392.11

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510004

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：170-171,175