睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的:克隆及表达人胶质瘤特异性抗原MAGE-E1基因片段.方法:从人胶质瘤细胞系BT-325提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-E1基因片段.将MAGE-E1 基因片段插入载体pGEM-T easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGE X- 4T-2中,构建重组表达载体pGEX- 4T-2-MAGE-E1,并转化大肠杆菌进行表达.结果:用1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5 h,MAGE-E1蛋白的表达即达高峰. SDS-PAGE及凝胶密度扫描分析表明,表达出Mr约4 1 000大小的蛋白,占菌体总蛋白的35%.结论:该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体,以及制备肿瘤疫苗奠定了基础.

关键词：睾丸肿瘤抗原、基因克隆、表达

所属期刊栏目：19

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30100218;教育部高校骨干教师资助计划2000-65-66;教育部留学回国人员科研启动基金1999-747

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：148-149,155