LAIR基因的克隆、原核表达及免疫反应性鉴定

摘要：

目的:克隆和表达淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体(leukocyte-associated immun oglobulin-like receptor,LAIR),鉴定抗LAIR-1 单克隆抗体(mAb)与LAIR-2分子的免疫反应性.方法:利用RT-PCR,从人外周血单个核细胞(PBMC)及白血病细胞系Jurkat和HL-60中克隆了LAIR cDNA.将LAIR-1的胞膜外区基因及LAIR-2 cDNA,克隆入GST融合蛋白表达载体pGEX- 4T-3中.以其转化E.coli BL21菌株后,在IPTG诱导下进行表达,表达产物用谷胱甘肽交联的Sepharose 4B纯化.用间接ELISA法,鉴定抗LAIR-1 mAb对表达蛋白的免疫反应性.结果:克隆并表达了LAIR-1 和LAIR-2 cDNA.同时克隆了5种新的LAIR-1异型,其中从HL-60细胞克隆的2种包含LAIR-1开放读框(ORF),从Jurkat细胞中克隆的3种为LAIR-1 cDNA片段.mAb鉴定表明LAIR-1与LAIR -2的免疫反应性不同.结论:LAIR基因的转录、转录后的加工及表达,可能与个体和疾病状态有关.LAIR-1和LAIR-2免疫反应性的不同与其构象有关.

关键词：淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体、RT-PCR、开放读框、表位

所属期刊栏目：19

分类号：R392.12

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510004

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：118-120,123