10.3321/j.issn:1007-8738.2002.06.022
反义人钙周期素结合蛋白编码基因转染对胃癌细胞多药耐药性的影响
目的研究hCacyBP编码基因在胃癌多药耐药机制中的作用.方法采用Northern杂交, 检测SGC7901细胞及SGC7901/ADR细胞中hCacyBP mRNA表达水平的差异.将hCacyBP cDNA克隆到pcDNA3.1中, 构建反义核酸真核表达载体pcDNA3.1/hCacyBP-, 并转染耐阿霉素人胃癌细胞, 用RT-PCR检测转染细胞中hCacyBP mRNA水平的变化. 用MTT比色法和FCM, 分别检测SGC7901/ADR细胞、pcDNA3.1/hCacyBP-和pcDNA3.1分别转染的SGC7901/ADR细胞, 对ADR的药物敏感性和胞内ADR的蓄积浓度.结果 Northern杂交证实, SGC7901/ADR细胞中hCacyBP mRNA表达的水平显著高于SGC7901细胞.成功地构建了pcDNA3.1/hCacyBP-.以pcDNA3.1/hCacyBP-转染的SGC7901/ADR细胞中hCacyBP mRNA的表达水平, 显著低于空载体转染及未转染的SGC7901/ADR细胞.MTT检测表明, 转染pcDNA3.1/hCacyBP-的细胞, 对ADR的药物敏性较空载体转染及未转染的SGC7901/ADR细胞有所增高, 生存率较后两者为低. FCM显示, 转染pcDNA3.1/hCacyBP-的 SGC7901/ADR细胞、转染pcDNA3.1及未转染的SGC7901/ADR细胞内ADR的蓄积浓度, 分别为6.72、5.62和5.54.结论 hCacyBP碥码基因对胃癌细胞的MDR有一定的影响, CacyBP可能是一种胃癌细胞MDR中的重要分子.
胃癌、SGC7901细胞、多药耐药、阿霉素、钙周期素结合蛋白、聚合酶链反应、基因转染、流式细胞仪
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R735.2(肿瘤学)
国家自然科学基金30030140
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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