重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析

摘要：

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体, 研究变异所致乙肝表面抗原(HBsAg)免疫学性状的改变.方法利用Dra Ⅲ和XhoⅠ双酶切含有突变位点的HBV DNA 1.2拷贝的质粒P3.8Ⅱ, 获得904 bp带有突变点的HBV-S基因片段.将其置换含有HBV DNA(adr亚型) S和S2片段的真核表达载体pCMV-S2.S的相应片段, 从而构建s基因nt587 G→A突变的真核表达载体pCMV-S2.S+145R; 并转染人肝癌细胞系Hep G2, 以获得分泌变异型HBsAg的细胞系.利用EIA及细胞免疫染色法, 探讨变异抗原与抗-HBs结合力的变化.结果构建了HBsAg 的第145位甘氨酸→精氨酸突变体的真核表达载体.将其转染哺乳动物细胞后第3天, 培养上清中用EIA检测HBsAg呈阳性, A值随时间延长而上升, 但变异型的A值明显低于野生型.变异型与野生型HBsAg细胞免疫化学检测均有部分细胞呈阳性, 但差别不显著.结论 HBsAg第145位甘氨酸→精氨酸的突变体的真核表达载体表达产物具有良好的抗原性, 能够与抗-HBs结合, 但与野生型相比结合力明显降低.

关键词：乙型肝炎表面抗原、变异、真核表达

所属期刊栏目：18

分类号：R373.2+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金39970676396670669

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：565-567,574