OPG与MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的克隆人骨保护素(OPG) 成熟肽段编码区基因, 并在大肠杆菌中表达.方法采用RT-PCR法, 扩增人OPG成熟肽段编码区cDNA, 并克隆入原核表达载体pMAL-c2x中, 转化BL21(DE3)PlysS大肠杆菌感受态细胞.经0.1 mmol/L IPTG诱导后, 收集菌体蛋白, 进行SDS-PAGE及Western blot鉴定. 结果获得人OPG成熟肽段编码区cDNA, 以构建的原核表达载体pMAL-OPG转化菌株后, 可表达人OPG和麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白, 相对分子质量(Mr)为85 000.表达产物的蛋白量约为菌体总蛋白的13%.Western blot 表明, 融合蛋白能与抗人OPG多克隆抗体特异性结合.结论获得人OPG成熟肽全长cDNA, 并在大肠杆菌中以OPG-MBP融合蛋白的形式表达.

关键词：骨保护素、克隆、大肠杆菌、表达

所属期刊栏目：18

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：551-553