中国株HIV-1结构蛋白基因gag与gp120在巴斯德毕赤酵母中的融合表达

摘要：

目的将中国流行株B亚型HIV-1结构蛋白基因gag和gp120在巴斯德毕赤酵母中进行融合表达.方法以酵母分泌型表达质粒pPIC9为载体, 构建含HIV-1 gag和gp120嵌合基因的重组酵母表达质粒pPICGP.用Sac I 将pPICGP线性化后, 电转化巴斯德毕赤酵母GS115, 用PCR的方法鉴定阳性酵母转化子.阳性转化子在巴斯德毕赤酵母中用甲醇进行诱导表达, 表达产物以SDS-PAGE和Western blot进行分析, 并对阳性菌株的遗传稳定性进行研究. 结果 12个酵母转化子中共筛选到了8个阳性酵母转化子, 其整合率为66.7%.SDS-PAGE和Western blot分析显示, 在相对分子质量(Mr)为57 000处有1条特异蛋白带, 且能与抗p24单抗(mAb)和抗gp120mAb发生反应.酵母转化子在YPD培养基上传代10次后, 其外源基因未丢失.结论在巴斯德毕赤酵母中成功地表达了HIV-1 gag-gp120嵌合基因, 且表达蛋白具有特异性, 但其Mr较预计计算的值要小, 说明嵌合基因中的gp120基因只有部分进行了表达.

关键词：HIV-1、结构蛋白、毕赤巴斯德酵母、融合表达

所属期刊栏目：18

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金39825119

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：426-428