大鼠IL-6受体基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的获取大鼠IL-6受体(IL-6R)的基因并高效表达.方法用PCR技术, 从正常成年大鼠脑的cDNA文库中, 获得编码IL-6R基因的序列.测序后, 通过PCR扩增和基因重组, 分别构建IL-6R基因全长和羧基端部分编码序列的表达载体, 并导入大肠杆菌DH5α中, 通过IPTG诱导表达重组融合蛋白.对表达的羧基端序列编码的融合蛋白过谷胱甘肽琼脂糖柱进行纯化. 结果获得正常成年大鼠IL-6R(98～1 493位)的基因, 测序结果与已发表的基因序列相一致.重组蛋白以包涵体的形式进行表达.经SDS-PAGE分析, 在相对分子质量(Mr)为74 000和43 000处, 各有1条特异的蛋白带.对羧基端基因表达的包涵体形式的蛋白进行变性、重折叠及纯化后, 得到了高纯度融合蛋白.结论成功地克隆正常成年大鼠IL-6R基因, 并在E. Coli DH5α中高效表达, 为进一步制备抗IL-6R抗体和进行原位分子杂交研究创造了条件.

关键词：IL-6受体、克隆、表达

所属期刊栏目：18

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金39830130

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：417-420