免疫亲和层析法纯化重组人促红细胞生成素的实验研究

摘要：

目的以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素(rhEPO).方法以rhEPO作为抗原,免疫Balb/C小鼠,制备抗rhEPO单克隆抗体(mAb).以纯化的抗rhEPO mAb 2F12与预活化的Sepharose 4B偶联,制成抗体亲和层析柱,纯化rhEPO.结果经筛选共获得4株可分泌抗rhEPO mAb的杂交瘤细胞株,分别为:1A8、 2F12、 3D4和3F10.亲和层析纯化的rhEPO经SDS-PAGE显示单一条带; 2 g凝胶制备的层析柱一次层析可获得1.5 mg高纯度的rhEPO.利用纯化的mAb建立的ELISA法,用于检测rhEPO的蛋白含量可达ng水平.结论免疫亲和层析法纯化rhEPO的效率高、纯度好,用纯化的mAb建立的ELISA法具有灵敏度高、重复性和稳定性好等优点.

关键词：重组人红细胞生成素、单克隆抗体、免疫亲和层析、酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：18

分类号：R392.12

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：408-411