重组人Ⅱ型胶原蛋白免疫原性多肽表达的研究

摘要：

目的构建编码人Ⅱ型胶原蛋白250～270多肽片段(HuC Ⅱ 250～270)的多聚基因,以获得高效表达、高度可溶和便于纯化的重组多肽基因.方法选用大肠杆菌(E.coli)偏爱密码子优化HuC Ⅱ 250～270的基因组成.通过化学合成和PCR法,获得HuC Ⅱ 250～270的基因,并利用Bam HI和BglⅡ同裂酶进行酶切位点串联获得6聚体.对影响重组HuC Ⅱ 250～270表达的各种因素进行系统研究,以获得优化表达的条件.对表达产物进行分离纯化.结果酶切分析和DNA测序证实,6聚目的基因的构建正确.融合表达的量明显高于非融合表达,在优化条件下,可达30%.表达产物的可溶性明显提高(在90%以上),其相对分子质量(Mr)与预期的相符,纯化后的纯度达90%以上.结论实现了HuC Ⅱ 250～270的高效表达,为研究类风湿性关节炎的发病机制和治疗提供了实验依据.为在原核细胞中高效表达的胶原蛋白的功能性小片段,提供了可供参考的借鉴.

关键词：Ⅱ型胶原蛋白、表达、类风湿性关节炎、多肽

所属期刊栏目：18

分类号：R392.11

资助基金：国家科技攻关项目9690105262

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：383-386