Notch信号途径效应分子HES1的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的原核表达HES1分子,并制备其特异性多克隆抗体,以研究该分子在肿瘤细胞中的表达情况.方法诱导表达GST- HES1融合蛋白和GST,经谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和纯化后,用GST偶联预激活的Sepharose 4B,以GST-HES1为免疫原制备兔抗血清.得到的抗血清经GST-Sepharose 4B吸收抗GST成分,以间接ELISA和Western blot鉴定抗体特异性,以Western blot分析胃癌、结肠癌及其相应非癌变组织中HES1的表达水平.结果成功地表达并纯化了GST-HES1融合蛋白.制备的抗HES1多克隆抗体具有很高的特异性,与GST或大肠杆菌成分无交叉反应,用于进行天然HES1分子的Western blot检测时效果良好.初步检测发现,胃癌和结肠癌中HES1的表达水平明显高于相应的正常组织.结论通过原核表达并纯化HES1,成功地制备了该分子的特异性多克隆抗体,初步应用效果满意.

关键词：Notch途径、HES1分子、抗体、原核表达

所属期刊栏目：18

分类号：R735.1(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金C39800159C39880011

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：329-331