人CD81的克隆及在COS-7细胞中的表达

摘要：

目的从人外周血淋巴细胞中克隆出CD81基因,构建真核表达质粒,并在COS-7细胞中进行表达.方法分离外周血淋巴细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR扩增CD81基因.将CD81基因克隆至载体pcDNA3.1(+)中,进行酶切及测序鉴定.以质粒pcDNA3.1-CD81转染COS-7细胞进行瞬时表达,并用免疫细胞化学染色法和流式细胞术检测蛋白的表达.结果 RT-PCR产物已插入载体pcDNA3.1(+)构建成真核表达质粒pcDNA3.1-CD81.经双酶切和测序鉴定表明,克隆出的人CD81全长编码序列同GenBank收录的序列一致,并且真核表达质粒的构建正确.以脂质体转染COS-7细胞后,用免疫细胞化学染色法和流式细胞术检测表明,细胞可表达人CD81.结论成功地构建真核表达载体pcDNA3.1-CD81,为进一步研究HCV和CD81的相互作用,以及建立可能的HCV细胞感染模型打下了基础.

关键词：CD81、克隆、表达、COS-7细胞

所属期刊栏目：18

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家科技攻关项目96-906-03-06

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：107-109