H-2Kb-BSP融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化

摘要：

目的构建可生物素化H-2Kb-BSP 融合基因的表达载体.方法采用PCR技术,从pBluescript(+)-Kb中扩增出H-2Kb基因的胞外区,拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列后,克隆入pET-42b(+)高效表达载体进行诱导表达.并对表达产物进行纯化与复性.结果成功地构建了融合表达载体pET-H  2Kb-BSP,对表达产物进行纯化与复性,并应用仅识别完整构象的抗Kb分子的单克隆抗体对复性后产物进行了检测.证明表达产物已部分恢复了构象.结论获得H-2Kb-BSP融合蛋白的高效表达,为研究在原核系统中表达、纯化与复性,以及进一步利用亲和素在体外构建MHC-I类分子四聚体,探讨免疫识别机制奠定了基础.

关键词：H-2Kb、基因表达、纯化、复性

所属期刊栏目：18

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金39800132;上海市高校科技发展基金98BJ01

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：30-32