稀土离子诱导钙调蛋白构象变化的单克隆抗体制备（摘要）

摘要：

@@ 钙调蛋白是广泛存在于生物体内的一种多功能的调节蛋白,它通过结合钙离子后自身的构象变化参与许多细胞代谢调控过程.已有文献报道,三价的稀土离子可以拮抗钙调蛋白的调节作用,原因可能是稀土离子和钙调蛋白结合后改变了它的构象变化.
为了研究金属离子对钙调蛋白三级结构变化的影响,我们采用免疫化学的方法,制备稀土离子诱导钙调蛋白构象变化后的单克隆抗体,来研究金属离子诱导钙调蛋白构象变化后与抗体的分子识别能力差异.牛脑钙调蛋白经超滤脱钙后,用2,4-二硝基氟苯修饰,以增强其免疫原性,再与三价的铕离子饱和,以此作为抗原免疫Balb/c小鼠.免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选克隆制备单克隆抗体.结果表明,修饰后的蛋白免疫原性得到改善,小鼠免疫一周后即在尾血中检测到了抗体的产生,血清效价为1:12000;细胞融合后经筛选得到一株细胞株2C3;ELISA结果表明该抗体与铕离子饱和后的钙调蛋白的识别能力要高于脱去金属离子后的钙调蛋白与抗体的识别能力,说明钙调蛋白分子结合稀土离子后发生了较大的构象变化.该抗体可以用于进一步研究不同金属离子对钙调蛋白构象变化的影响,以及钙调蛋白抗原决定簇的定位.

机标关键词：稀土离子、离子诱导、钙调蛋白、构象变化、金属离子、单克隆抗体、识别能力、免疫原性、细胞融合、铕离子、小鼠脾细胞、离子对、抗原决定簇、二硝基氟苯、血清效价、小鼠免疫、生物体内、筛选、能力差异、免疫化学

所属期刊栏目：17

分类号：Q5(生物化学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

页码：461-461