抗重组 GST单克隆抗体的制备及其在融合蛋白纯化中的应用

摘要：

目的制备抗重组 GST的单克隆抗体 (mAb), 并用来纯化重组 GST融合蛋白。方法用含重组 GST融合蛋白基因的 pGEX4T -1质粒转化 E.coli BL21， IPTG诱导 GST融合蛋白表达，亲和层析和凝胶过滤法分离表达的重组 GST融合蛋白。以此蛋白作为抗原，免疫 Balb/c小鼠，按传统的杂交瘤技术制备 mAb。将抗 GST mAb经 Protein A纯化后，与 Sepharose 4B偶联。结果经 3次亚克隆后，获得两株分泌抗 GST载体特异性 mAb的杂交瘤。采用该 mAb对两种不同的 GST融合蛋白进行亲和层析纯化后，经 SDS-PAGE鉴定达到了商品化 Glutathione-Resin的亲和层析纯化效果。结论用抗 GST蛋白特异性 mAb亲和层析纯化融合蛋白是一种经济、实用的方法，且可用于 Glutathione-Resin亲和层析纯化后的二次纯化。

关键词：GST、mAb、纯化、亲和层析

所属期刊栏目：17

分类号：R392.11

资助基金：吉林省科技厅科研项目19980580

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

页码：365-367