噬菌体呈现抗体库的构建及抗 Fas-Fab抗体的研究

摘要：

目的构建噬菌体抗体库，获得具有功能的抗Fas-Fab噬菌体抗体。方法以Fas重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠。取其脾细胞提取mRNA,采用RT-PCR方法扩增抗体基因，构建重链和κ链基因库，用重组Fas抗原对所构建的抗体库进行4轮筛选，并以ELISA法鉴定其功能。结果获得抗体重链Fd基因和κ链基因长度约700bp。构建的重链Fd基因为3.5×106的抗体重链基因库。构建的重链和κ链基因库的容量均为3.1×106。经VCSM13感染得到噬菌体的滴度为8.9×1016cFu/L的噬菌体抗体库，含有抗体重链和κ链基因的噬菌体占27％。用重组人Fas抗原进行4轮筛选，得到100％的富集，说明Fas重组抗原富集了抗Fas-Fab噬菌体抗体，经ELISA检测均有抗Fas抗体的特异性。结论制备的可溶性抗Fas-Fab抗体具有抗Fas抗体的特异性，为进一步的研究奠定了基础。

关键词：Fas、细胞凋亡、噬菌体呈现抗体库技术

所属期刊栏目：17

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金39800198;全军重点项目96Z038;重庆市科技攻关项目980012

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：182-185