用EBV转化的大肠癌患者B细胞构建噬菌体抗体库

摘要：

目的构建全人源化的噬菌体抗体库。方法采用EBV转化技术，ELISA技术，PCR技术，噬菌体表面呈现技术。结果 EBV转化8例大肠癌患者PBMC，其中七例有抗大肠癌抗体产生，多次PCR扩增出5种VH(γ,μ)和9种VL(к,λ)基因，经简并组合成15种ScFv基因。在体外与表达载体fUSE5连接，电导入大肠杆菌MC1061，经四环素
抗性筛选，得到库容为1.1×107的初级噬菌体抗体库。全长ScFv基因的插入率为70％。结论应用EBV转化技术联合噬菌体抗体库技术，制备全人源化的抗肿瘤单链抗体(ScFv)，这一策略是完全可行的。

关键词：EB病毒转化、聚合酶链式反应、噬菌体抗体库、大肠癌、单链抗体

所属期刊栏目：16

分类号：R739.6(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39900141

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：495-498