人TRAIL在毕氏酵母表达系统中的表达

摘要：

目的在甲醇营养型酵母(Pichia)中,表达人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)分子.方法将可溶性TRAIL基因片段插入酵母表达载体pIC 3.5,经氯化锂转化酵母GS115,甲醇诱导表达,5 d后用SDS-PAGE和Western-blot进行分析,并用L929细胞测定其活性.结果在酵母细胞中表达的TRAIL,SDS-PAGE分析占总蛋白的50%以上.用抗人TRAIL多抗检测表明,表达的TRAIL分子,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的TRAIL明显提高,并能诱导几株肿瘤细胞DNA片段化,说明TRAIL可能已正确折叠并形成活性必须的高级结构.结论在Pichia系统中成功地表达人可溶性TRAIL分子,为研究其作用机制创造了条件.

关键词：TRAIL、序列、克隆、真核表达

所属期刊栏目：16

分类号：Q73(生物膜的结构和功能)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：420-424