重链可变区基因随机CDR3ScFv噬菌体抗体库的构建及筛选

摘要：

目的构建VH基因随机CDR3ScFv噬菌体抗体库,并筛选抗HFRS病毒NP抗原的噬菌体抗体.方法采用随机引物PCR法扩增抗HFRS病毒mAb1A8的VH基因,并与1A8VL基因共同克隆入噬菌粒表达载体pHEN1后,构建VH基因随机CDR3ScFv基因库.继用辅噬菌体VCSM13超感染后得到噬菌体抗体库,然后用HFRS病毒抗原进行筛选.随机挑取筛选的菌落超感染,用夹心ELISA检测超感染上清.结果获得库容量约为107噬菌体抗体库.夹心ELISA的结果表明,筛选出的噬菌体抗体可与HFRS病毒NP抗原特异性结合.结论成功地构建了库容量较高的ScFv噬菌体抗体库,并获得可与HFRS病毒NP抗原结合的噬菌体抗体.

关键词：单链抗体、噬菌体抗体库、肾综合征出血热病毒、亲和力、成熟

所属期刊栏目：16

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目39700134

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：171-173