10.3321/j.issn:1007-8738.2000.02.008
具有GPX活性的单克隆抗体可变区基因的克隆和序列分析
目的利用分泌具有GPX活性的单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞3G5,克隆其mAb体的可变区基因.方法提取杂交瘤细胞的总RNA,分离mRNA,反转录合成cDNA.经PCR扩增VH基因和VL基因,将VH基因和VL基因与载体pGEM-T连接后,进行酶切鉴定和序列分析.结果构建了2个分别含有VH和VL基因的重组质粒.序列分析表明,VH和VL分别属于ousc heavy chain subgroupIII和mouse light chain subgroupV亚群,长度为372和324bp,编码124和108个氨基酸,在高变区分别有4和2个丝氨酸.结论克隆的VH和VL基因符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征,为将来制备具有GPX活性的单链抗体提供了可靠的基因材料.
谷胱甘肽过氧化物酶、抗体酶、可变区基因、克隆
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R392.11
中国科学院资助项目39770174
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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116-119