新型冠状病毒假病毒制备方法的优化及应用
该文旨在建立一种稳定高效的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)假病毒构建方法,并将所制备的假病毒用于评估抗体中和水平.通过比较不同穿梭质粒、质粒配比以及转染试剂对假病毒滴度的影响,优化制备高滴度假病毒的条件;通过制备不同的SARS-CoV-2突变株假病毒,测试该方法的稳定性;利用所制备的假病毒对SARS-CoV-2抗体的中和能力进行评价,测试该方法的可靠性.优化结果表明,当使用LipofectamineTM 3000作为转染试剂时,pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP:psPAX2:pcDNA3.1-S以0.300 μg:0.225 μg:0.240 μg的质量比转染获得的假病毒滴度最高.进一步,发现利用该方法包装的三种突变株的假病毒均可达到较高滴度.利用该方法制备的假病毒可以用于SARS-CoV-2抗体的中和活性检测,测得IC50值为0.126 μg/mL.该研究成功建立了一种简单高效的制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)假病毒的方法,其可用于体外评估SARS-CoV-2抗体中和活性,为研发SARS-CoV-2相关疫苗和药物的体外评价提供了技术基础.
假病毒、中和抗体、新型冠状病毒
45
R373;R511;Q291
重庆市自然科学基金面上项目;重庆市科研机构绩效激励引导专项;重庆市科研机构绩效激励引导专项;畜禽养殖关键技术研究与示范推广项目;畜禽养殖关键技术研究与示范推广项目;畜禽养殖关键技术研究与示范推广项目;资助的课题
2023-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
662-669
