CRISPR/Cas9介导RSAD2基因敲除的ST细胞模型建立

摘要：

RSAD2是一种多功能干扰素(interferon,IFN)诱导蛋白.该研究利用CRISPR/Cas9系统建立了RSAD2基因敲除的猪睾丸细胞系(swine testicular cell,ST cell)模型.应用在线工具设计了针对RSAD2基因的4条sgRNA,并将其克隆至pX459载体.经嘌吟霉素初步筛选、Western blot检测确定了 RSAD2-sgRNA-4具有最优敲除效果.该实验通过单克隆化转染RSAD2-sgRNA-4的ST细胞后成功获得RSAD2基因敲除ST细胞模型.双荧光素酶活性实验及实时荧光定量PCR实验(RT-qPCR)证明,RSAD2基因敲除对ST细胞的IFN-β、IRF3、NF-κB基因启动子活性及mRNA水平没有明显影响.该实验利用CRISPR/Cas9系统构建并获得稳定敲除RSAD2基因的ST细胞模型,为RSAD2功能研究提供有力工具.

关键词：RSAD2、CRISPR/Cas9系统、基因敲除

所属期刊栏目：44

分类号：R780.2;R285.5;TS201.4

资助基金：国家重点研发计划;资助的课题

在线出版日期：2022-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1069-1076