PTEN通过抑制GCLM表达促进铁死亡

摘要：

为探讨抑癌基因Pten在铁死亡中的作用及其潜在的机制,该文将Pten基因缺失小鼠胚胎成纤维细胞(Pten-/-)与其对照野生型细胞(Pten+/+)用不同浓度的铁死亡诱导剂(Erastin)处理,或在Erastin处理的同时分别加入抗氧化剂、铁死亡抑制剂、坏死性凋亡抑制剂、凋亡抑制剂和自噬抑制剂,用CCK-8法检测细胞增殖能力;PI染色检测细胞死亡情况;用流式细胞测量术检测细胞脂质过氧化物水平,组织细胞谷胱甘肽检测试剂盒检测谷胱甘肽水平;蛋白质免疫印迹检测PTEN、P-AKTs473、AKT和GCLM蛋白表达水平;RT-qPCR检测Gclm mRNA表达水平;Erastin处理GCLM敲低组与对照组,用CCK-8法检测细胞增殖能力.实验结果显示,与对照组相比,Pten-/-细胞对Erastin的耐受性增强(P＜0.05);Erastin诱导的Pten+/+细胞死亡可以被抗氧化剂和铁死亡抑制剂逆转,不能被坏死性凋亡抑制剂、凋亡抑制剂、自噬抑制剂逆转(P＜0.05);Erastin处理后,与对照组相比Pten-/-细胞中脂质过氧化物水平(铁死亡检测指标)降低(P＜0.05),这些结果表明PTEN缺失能减弱细胞对铁死亡的敏感性.在机制上我们发现,与对照组相比Pten-/-细胞中谷胱甘肽水平升高(P＜0.05),GCLM的mRNA和蛋白水平升高(P＜0.05);Pten-/-细胞中敲低GCLM能增加细胞对Erastin的敏感性(P＜0.05).综上所述,PTEN能够通过抑制GCLM表达来提高细胞内脂质过氧化水平从而促进铁死亡发生.

关键词：PTEN、GCLM、铁死亡、谷胱甘肽

所属期刊栏目：44

分类号：R737.33;R963;R363

资助基金：国家自然科学基金;资助的课题

在线出版日期：2022-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1011-1019