lncRNA SOX2-OT通过调控miR-519e-5p影响乳腺癌细胞增殖及放射敏感性的分子机制研究

摘要：

该研究探讨了 lncRNA SOX2-OT对乳腺癌细胞增殖和放射敏感性的影响及可能机制.采用qRT-PCR法检测了正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和Bcap-37)中lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p表达.乳腺癌 T47D细胞中 lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p表达较MCF-10A细胞差异最显著(P＜0.05),选择乳腺癌T47D细胞为研究对象.采用核质分离及RNA荧光原位杂交分析lncRNA SOX2-OT在T47D细胞内的定位.分别向T47D细胞转染lncRNA SOX2-OT小干扰RNA、miR-519e-5p模拟物、过表达RNA SOX2-OT、共转染lncRNA SOX2-OT小干扰RNA与miR-519e-5p抑制剂、共转染过表达RNA SOX2-OT与miR-519e-5p模拟物,即得si-lncRNA SOX2-OT组、si-NC组、miR-519e-5p组、miR-NC组、si-lncRNA SOX2-OT+anti-miR-519e-5p组、si-lncRNA SOX2-OT+anti-miR-NC组、RNA SOX2-OT+miR-519e-5p mimics组、si-lncRNA SOX2-OT+miR-NC组.采用CCK-8法观察细胞增殖活性,克隆形成实验计算细胞存活分数,并用单击多靶数学模型计算细胞增敏比,蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1和y-H2AX蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p的调控关系.结果显示,lncRNA SOX2-OT主要定位于T47D的细胞质.敲减lncRNA SOX2-OT或上调miR-519e-5p后,T47D细胞增殖活性和存活分数均降低(P＜0.05),增敏比分别为1.195、1.343,细胞中CyclinD1蛋白表达降低(P＜0.05),γ-H2AX蛋白表达升高(P＜0.05).lncRNA SOX2-OT在T47D细胞中靶向负调控miR-519e-5p.下调或上调miR-519e-5p可分别逆转敲减或上调lncRNA SOX2-OT对T47D细胞增殖和放射敏感性的影响.总之,lncRNA SOX2-OT可能通过靶向负调控miR-519e-5p促进乳腺癌细胞增殖并降低乳腺细胞对放射的敏感性.

关键词：乳腺癌、lncRNA SOX2-OT、miR-519e-5p、细胞增殖、放射敏感性

所属期刊栏目：44

分类号：R737.9;S826.2;R329.2

资助基金：嘉兴市科技计划项目;资助的课题

在线出版日期：2022-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1001-1010