利用FRET技术研究小鼠PU.1和KLF7蛋白相互作用
PU.1和KLF7基因在多个组织中的表达具有相关性.在前脂肪细胞分化过程中,两个转录因子都可以通过抑制PPARγ的表达而抑制脂肪形成.然而两者是否存在蛋白水平相互作用还不清楚.为了验证PU.1和KLF7在前脂肪细胞中的关系,该研究构建了重组表达载体pECFP-N1-PU.1和pEYFP-N1-KLF7,并瞬时转染到3T3-L1前脂肪细胞系中.利用激光共聚焦显微镜,观察到PU.1和KLF7蛋白共定位于3T3-L1细胞核中.荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)实验分析显示,PU.1和KLF7之间有明显的能量共振转移.实验结果证实,PU.1和KLF7之间存在直接的相互作用关系,为脂肪生成的调控机制研究提供新思路.
荧光共振能量转移;PU.1;KLF7;3T3-L1
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国家自然科学基金;黑龙江省自然科学基金;黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目植物性食品加工技术特色学科专项
2021-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1729-1736